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通蔚生物NAD蘋(píng)果酸脫氫酶(NAD-MDH)測試盒微量法測定意義

日期:2024-07-22 10:24
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摘要:通蔚生物NAD蘋(píng)果酸脫氫酶(NAD-MDH)測試盒微量法測定意義 測定意義: MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養細胞中,線(xiàn)粒體中 MDH 是 TCA 循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋(píng)果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中 MDH 催化草酰乙酸形成蘋(píng)果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH 在細胞多種生理活動(dòng)中扮演著(zhù)重要的角色,包括線(xiàn)粒體的能量代謝、 蘋(píng)果酸-天-冬氨-酸穿梭系統、活性氧代謝和抗病性等。根據不同的輔酶特異性,MDH 分為 NAD-依賴(lài)的 MDH 和 NADP-依賴(lài)的MDH,中通常只含有 NAD-MDH,在真核細胞中,NAD-MDH...
通蔚生物NAD蘋(píng)果酸脫氫酶(NAD-MDH)測試盒微量法測定意義

測定意義:
MDH (EC 1.1.1.37)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養細胞中,線(xiàn)粒體中 MDH 是 TCA 循環(huán)的關(guān)鍵酶之一,催化蘋(píng)果酸形成草酰乙酸;相反,胞漿中 MDH 催化草酰乙酸形成蘋(píng)果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物, 連接多條重要的代謝途徑。因此,MDH 在細胞多種生理活動(dòng)中扮演著(zhù)重要的角色,包括線(xiàn)粒體的能量代謝、 蘋(píng)果酸-天-冬氨-酸穿梭系統、活性氧代謝和抗病性等。根據不同的輔酶特異性,MDH 分為 NAD-依賴(lài)的 MDH 和 NADP-依賴(lài)的MDH,中通常只含有 NAD-MDH,在真核細胞中,NAD-MDH 分布于細胞質(zhì)和線(xiàn)粒體中。
測定原理:
NAD-MDH 催化 NADH 還原草酰乙酸生成蘋(píng)果酸,導致 340nm 處光吸收下降。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標-儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板和蒸餾水。
樣本測定的準備:
1、細胞或組織樣品的制備:
培養細胞:先收集或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照或細胞數量(104 個(gè)):試劑一體積(mL)為 1000~2000:1 的比例(建議 2000 萬(wàn)或細胞加入 1mL 試劑一),超聲波破碎或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱(chēng)取約 0.1g 組織,加入 1mL 試劑一),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
上海通蔚生物一直致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供的NAD蘋(píng)果酸脫氫酶(NAD-MDH)測試盒科研試劑和完善的技術(shù)服務(wù),滿(mǎn)足生物化學(xué)、分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生物科技實(shí)驗需求。